无细胞表达膜蛋白“叒”获突破,SPR实测超高亲和力!

2025-11-18

在药物开发领域,靶点膜蛋白制备一直是科研工作者面临的重大挑战。传统表达系统难以实现功能性膜蛋白的高效制备,严重制约了药物开发进程。

近日,珀罗汀生物采用无细胞蛋白表达系统,成功制备出高活性人源SSTR2膜蛋白,经表面等离子共振技术完成精准亲和力检测,实测其对相应抗体展现出超高亲和力,KD值达0.649 nM!

SPR技术:分子互作检测的"金标准"

表面等离子共振技术(SPR)作为无标记、实时监测生物分子相互作用的权威方法,能够精准解析结合参数(ka、kd及KD值),提供分子互作的全面信息,被业界公认为亲和力检测的可靠技术平台。

 

本次实验以Tidutamab类似物(Human IgG1)作配体,将其捕获在Protein A芯片,浓度为1 μg/mL。将分析物SSTR2膜蛋白稀释为5个浓度梯度(12.5 nM ~200 nM),分别进行检测。SSTR2膜蛋白由珀罗汀生物无细胞蛋白表达平台制备,产品名称:Human SSTR2 Full-Length Protein,产品编号:PLDP0047-1;运行试剂:1*PBS,0.05% DDM,0.01% CHS,pH 7.4。

珀罗汀膜蛋白产品目录

SSTR2膜蛋白SDS-PAGE

经亲和力检测以及动力学曲线拟合,SSTR2膜蛋白与Tidutamab类似物的亲和力常数为0.649 nM

无细胞表达技术:膜蛋白研究的利器

无细胞蛋白表达(CFPS)是一种体外直接合成蛋白质的生物反应。珀罗汀无细胞膜蛋白表达技术可控性、开放性高,可以在体系中直接添加去垢剂纳米盘,为膜蛋白提供类膜环境,从而实现全长膜蛋白可溶性表达。珀罗汀无细胞系统在合成膜蛋白时,无需细胞内表达时复杂的靶向、插入、组装过程,极大提高表达成功率。

无细胞+去垢剂表达体系特点:

规避毒性问题:无需维持细胞活力,可大量表达膜蛋白;

折叠环境可控:通过优化去垢剂类型和浓度,为膜蛋白提供最适折叠环境。

无细胞+纳米盘表达优势显著:

模拟天然环境:在天然脂质双分子层中完成膜蛋白折叠;

功能更完整:更接近生理状态下的构象和活性。

本次实验不仅验证了无细胞表达技术制备高活性膜蛋白的可靠性,更彰显了“无细胞表达+SPR检测”组合在膜蛋白研究与药物开发中的重要价值:无细胞表达极大提高膜蛋白表达成功率,所得膜蛋白抗原表位完整;SPR提供全亲和力参数,结果准确可信。

无细胞表达+SPR检测”的新组合将为膜蛋白研究带来革命性突破!