实验室新潮流!CFPS技术让蛋白质研究更“嗨”

2025-07-18


 

引言

在生物技术日新月异的今天,无细胞蛋白表达(Cell-Free Protein Synthesis, CFPS)技术正逐渐成为实验室研究中不可替代的技术。其通过模拟细胞内环境,在体外实现蛋白质的快速合成,为基础研究、药物研发以及合成生物学等领域带来了革命性的变化。本文将带您深入探索CFPS技术在实验室中的创新应用及其深远影响。


 

一、实验室研究中的高效工具


 

1.快速验证蛋白质功能


 

传统的蛋白质功能验证方法往往依赖于细胞内的表达系统,这不仅需要耗费大量时间进行细胞培养、转染和筛选,还容易受到细胞内复杂调控网络的影响。而CFPS技术则能在体外快速、直接地合成目标蛋白质,避开了这些繁琐的步骤和潜在的干扰因素。研究人员只需将编码蛋白质的基因片段添加到无细胞反应体系中,即可在短时间内获得大量纯净的蛋白质样品。这些样品随后可用于各种生物化学和分子生物学实验,如酶活性测定、蛋白质相互作用分析等,从而快速验证蛋白质的功能特性。


 

图1:快速无细胞抗体筛选工作流程


 

2.精准解析蛋白质结构


 

蛋白质的结构是其功能的基础。了解蛋白质的三维结构对于揭示其生物学功能、设计药物分子以及开发新型生物材料具有重要意义。然而,传统的结构解析方法如X射线晶体学、核磁共振等往往需要高质量的蛋白质晶体或大量的蛋白质样品,且耗时较长。CFPS技术通过提供高纯度、高浓度的蛋白质样品,为这些结构解析方法提供了有力的支持。此外,该技术还可以结合先进的蛋白质标记和成像技术,如荧光共振能量转移(FRET)、圆二色性光谱(CD)等,对蛋白质在动态过程中的构象变化进行监测和解析,从而更加全面地了解蛋白质的结构与功能关系。


 

图2:用于生物大分子快速原位合成和组装的CFPS平台


 

3.促进蛋白质组学研究


 

蛋白质组学是研究生物体内所有蛋白质种类、结构、功能及其相互作用的科学。CFPS技术为蛋白质组学研究提供了强有力的工具。通过高通量合成蛋白质库中的成员,研究人员可以快速筛选出与特定生物学过程或疾病相关的蛋白质,并进一步研究其功能和结构。这种“从基因到蛋白质”的快速转化能力,极大地促进了蛋白质组学研究的进展,为揭示生命活动的复杂性和多样性提供了重要线索。

 

图3:不同氧浓度下无细胞系统的蛋白质组学分析


 

4.高通量筛选与药物发现


 

在药物研发领域,CFPS技术凭借其高通量、高效率的特点,成为筛选潜在药物靶点和优化药物分子的理想选择。通过构建包含大量基因片段的文库,并利用无细胞体系快速合成对应的蛋白质,研究人员可以在短时间内筛选出与疾病相关的重要蛋白,并进一步评估其作为药物靶点的潜力。并且,该技术还可用于药物分子的初步筛选和优化,为药物研发提供宝贵的线索和方向。通过快速合成药物靶标蛋白,研究人员可以高效筛选潜在的药物分子,加速新药的开发进程。此外,该技术还可以用于生产重组蛋白药物,如抗体、酶替代疗法药物等,为疾病治疗提供新的选择。


 

图4:使用无细胞系统合成的疫苗抗原


 

5.合成生物学与生物制造


 

随着合成生物学的兴起,CFPS技术在生物制造领域的应用也日益广泛。通过精确控制反应条件和优化反应体系,研究人员可以在体外合成具有特定功能的蛋白质、酶和其他生物分子。这些生物分子不仅可用于生物传感器、生物催化剂等新型生物材料的开发,还可为生物制造产业提供高效、可持续的生产方式。


 

图5:无细胞生物电子传感器


 

二、实验室操作的便捷性与灵活性


 

CFPS技术在实验室操作中也展现出了极高的便捷性和灵活性。相比传统的细胞培养技术,该技术无需复杂的细胞培养设备和条件控制,大大简化了实验流程。同时,由于反应体系可以在体外进行精确调控和优化,研究人员可以根据具体需求调整反应参数,以实现最佳的实验效果。这种灵活性不仅提高了实验的成功率和可重复性,也为科研人员提供了更多的探索空间和可能性。


 

三、技术原理与优势


 

CFPS技术基于细胞内的生物化学反应机制,利用细胞内的转录、翻译和修饰机制来实现蛋白质的表达和折叠。但它将这些反应转移到了更为简单、可控的体外环境中,通过模拟细胞内的蛋白质合成过程来实现蛋白质的体外合成。这一方法不仅避免了细胞培养的复杂性和耗时性,还提供了更高的灵活性和可调控性。相比传统细胞培养技术,CFPS技术具有诸多优势:


 

快速高效:能够在几小时内完成蛋白质的合成,大大缩短了实验周期。

可控性强:可以精确控制反应条件,如温度、pH值等,从而优化蛋白质的合成效率和质量。

灵活性高:可以灵活调整反应体系中的成分,以适应不同蛋白质的合成需求。

√成本低廉:相比细胞培养,无细胞体系不需要昂贵的培养基和细胞培养设备,降低了实验成本。


 

未来展望


 

未来,CFPS技术在实验室应用中的潜力将进一步被挖掘和释放。一方面,随着技术的不断成熟和完善,无细胞体系的稳定性和效率将得到进一步提升;另一方面,通过与人工智能、大数据等技术的深度融合,无细胞蛋白表达技术有望实现更加精准、高效的蛋白质合成和筛选。此外,跨学科合作的深入发展,使得该技术有望在更多领域实现创新突破。例如,在精准医疗领域,CFPS技术可用于个性化药物的定制生产;在环境保护领域,该技术可用于生物降解材料的研发和生产等。总之,CFPS技术作为实验室研究中的必备技术,将继续发挥其独特优势,为科学研究和技术创新贡献智慧和力量。

珀罗汀生物作为一家专业的无细胞蛋白表达生物技术公司,拥有国家高层次领军人才、海归博士等人才组成的专业技术团队,以自主研发、独具特色的无细胞蛋白表达技术平台为依托,专业从事多肽、重组蛋白、基因工程抗体、重组疫苗以及大分子蛋白药物的研究和开发,同时为广大生物医药企业和研究机构提供无细胞蛋白表达产品、蛋白原料试剂及定制化服务。


 

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参考文献:

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5. Manzer ZA, Ghosh S, Roy A, et al. Cell-Free Synthesis Goes Electric: Dual Optical and Electronic Biosensor via Direct Channel Integration into a Supported Membrane Electrode. ACS Synth Biol. 2023;12(2):502-510. doi:10.1021/acssynbio.2c00531.